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人腦微血管內(nèi)皮細胞

簡要描述:人腦微血管內(nèi)皮細胞分離自腦組織。腦微血管內(nèi)皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細胞等從血液進入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細胞與外周內(nèi)皮細胞相比具有一些相同特性。

  • 更新時間:2024-07-09
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:299

詳細介紹

品牌ATCC貨號YLK-XB0618h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源腦組織

人腦微血管內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品名稱 :人腦微血管內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0618h

組織來源 : 腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

腦微血管內(nèi)皮細胞分離自腦組織。腦微血管內(nèi)皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細胞等從血液進入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細胞與外周內(nèi)皮細胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。與外周內(nèi)皮細胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細胞表面表達細胞粘附分子,調(diào)控白細胞進入大腦。由于微血管內(nèi)皮細胞的器官特異性,內(nèi)皮細胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。


其主要特征如下
① 腦微血管內(nèi)皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細胞旁的通量。
② 腦微血管內(nèi)皮細胞缺乏內(nèi)皮細胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低。
③ 腦微血管內(nèi)皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉(zhuǎn)運系統(tǒng),從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明膠(0. 1%)
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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