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兔胰腺星狀細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述：兔胰腺星狀細(xì)胞胰腺進(jìn)行性纖維化是慢性胰腺炎典型的病理表現(xiàn)，在這個(gè)過(guò)程中扮演中心角色的是一種多角形或星狀細(xì)胞，即胰腺星狀細(xì)胞。胰腺星狀細(xì)胞分布在胰腺小葉間和腺泡間，在胰腺纖維化過(guò)程中，其被多種病理因子激活，分泌多種細(xì)胞外基質(zhì)，包括膠原、啟動(dòng)和促進(jìn)了纖維化這一病理過(guò)程。正常情況下，胰腺星狀細(xì)胞處于非激活的靜止期狀態(tài)，球形。當(dāng)胰腺受損傷或者受到細(xì)胞生長(zhǎng)因子等刺激后轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ顮顟B(tài)。

更新時(shí)間：2024-07-10
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
生產(chǎn)地址：上海
訪問(wèn) 量：316

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科研細(xì)胞

細(xì)胞系原代細(xì)胞

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詳細(xì)介紹

品牌	YLKBIO	貨號(hào)	YLK-XB1038h
規(guī)格	5*10^5	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	科研	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來(lái)源	胰腺組織

兔胰腺星狀細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：兔胰腺星狀細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB1038h

組織來(lái)源：胰腺組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸/氫鈉、胰蛋白/酶原、脂肪酶、淀粉/酶等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由 4 種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及 PP 細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌生長(zhǎng)/抑素，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP 細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC )是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞，PSC 分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。

未活性化的 PSC 胞漿中富含維 A 脂滴，并表達(dá) D esmin 蛋白，活化后的 PSC 則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alp h a-SM A )。PSC 具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC 胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A 脂滴可以被油紅O 染成紅色，陽(yáng)性表達(dá)D esmin。激活狀態(tài) PSC 陽(yáng)性表達(dá) alp h a-SM A 。油紅 O 染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細(xì)胞培養(yǎng) 6d，胞漿中仍可見(jiàn)明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示，細(xì)胞接種 24h 仍然表達(dá) D esmin，48h 后 D esmin 基本不再表達(dá)。

培養(yǎng) 48h 后絕大多數(shù)細(xì)胞開(kāi)始表達(dá) alp h a-SM A，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)和傳代次數(shù)的增加，細(xì)胞表達(dá) alp h a-SM A ，而不再表達(dá) D esmin，說(shuō)明細(xì)胞活化。提示 PSC 接種 24h 后即啟動(dòng)了激活過(guò)程，至培養(yǎng)第 6d 大多數(shù)細(xì)胞激活，傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時(shí)，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

細(xì)胞特性
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常胰腺組織。
2)細(xì)胞鑒定：結(jié)蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：多角型或星型細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng) 基：含 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin 等

換液頻率：每 2-3 天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳 3-5 代

傳代比例： 1:2

消化液： 0.25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% ；C O2，5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1) 收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。

5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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