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當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 科研細(xì)胞 > 原代細(xì)胞 > 復(fù)蘇/凍存大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞

大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞

簡要描述:大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞分離自肺小動脈組織;小動脈(sm allartery), 管 徑 在 0.3~ 1mm 之間,小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。

  • 更新時間:2024-07-10
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:336

詳細(xì)介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-XB1276h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源肺小動脈組織

大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1276h

組織來源 :肺小動脈組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

肺小動脈平滑肌細(xì)胞分離自肺小動脈組織;小動脈(sm allartery), 管 徑 在 0.3~ 1mm 之間,小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。

中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時,其管腔可以wan全閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20~30μm ;后小動脈(m etar-te riole),又稱毛細(xì)血管前小動脈(p recapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm 。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細(xì)血管前括約肌(p recapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 :  含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 傳代比例 1:2
消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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