无码人妻精品一区二区三区9厂_久久狠狠色噜噜狠狠狠狠97_浪荡女天天不停挨cao日常视频_国产精品成人aaaaa网站_精品一区二区三区自拍图片区

您好!歡迎訪問優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

15021281375

當(dāng)前位置:首頁 > 資料下載 > L-半乳糖酸-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)活性測定試劑盒說明書

L-半乳糖酸-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)活性測定試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/10/30      點擊次數(shù):376

L-半乳糖酸-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)活性測定試劑盒說明書

                                                微量法 100T/96S

 

 

    意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜,負責(zé)催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關(guān)鍵酶之一,對植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。

 

測定原理:

Gal LDH催化L-半乳糖內(nèi)酯還原細胞色素C(Cyt c),還原型Cyt c550nm有吸收峰;測定還原型Cyt c增加速率,來計算Gal LDH活性。

自備儀器和用品:

臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶(棕色),4℃保存。臨用前加入16mL蒸餾水,充分溶解。

試劑三:粉劑×1管,4℃保存。臨用前加入2mL蒸餾水,充分溶解。

 

粗酶液提取:

照組織質(zhì)量(g:試劑一體(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。13000g,4離心10min,取上清置冰上待測。

 

Gal LDH測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到550nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min。

3.依次在、微量玻璃比色皿/96孔板中加入20μL上清液、160μL預(yù)熱的試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于550nm比色,記錄10s130s的吸光值A1A2,A = A2A1。

 

Gal LDH活性計算公式:

使用96孔板測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

Gal LDH活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘還原1nmol Cyt c 1個酶活單位。

Gal LDH (nmol/min/mg prot) = A÷ε÷d×V反總×109÷Cpr×V樣)÷T

=578×A ÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

Gal LDH活性單位定義:25℃中每克樣品每分鐘還原1nmol Cyt c 1個酶活單位。

Gal LDH (nmol/min/g 鮮重) = A÷ε÷d×V反總×109÷W×V÷V樣總÷T

=578×A ÷W

 

ε:還原型Cyt c摩爾消光系數(shù),17.3×103L/ mol/cm;d96孔板光徑(cm)0.5cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.2mL=0.0002 L;1091mol=1×109nmolV樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,20μL=0.02mLV樣總:提取液體積,1 mLCpr:上清液蛋白濃度,mg/mL,蛋白質(zhì)濃度需要另外測定,建議使用本公司蛋白質(zhì)含量BCA試劑盒;T:反應(yīng)時間,2min

 

注意事項:

試劑二和試劑三配制好后3天內(nèi)使用完。


文件下載    圖片下載    
優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司
地址:金大公路8218號1幢
郵箱:1431486511@qq.com
傳真:
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號
了解更多信息
精品国产a∨无码一区二区三区| 国产午夜精品久久久久免费视| 亚洲精品久久久久一区二区| 青娱国产区在线| 伊人色综合久久天天| 最新国产精品精品视频| 男ji大巴进入女人的视频小说| 国内揄拍国内精品人妻| 无码国产精品一区二区免费式直播| 啦啦啦中文在线观看日本| 男女性色大片免费网站| 亚洲欧美中文日韩在线v日本| 中文字幕日本六区小电影| 欧美激情一区二区三区成人| 性猛交╳xxx乱大交| 亚洲av综合色区无码专区桃色| 老熟妇乱子伦牲交视频| 内射人妻视频国内| 国产粗话肉麻对白在线播放| 呦系列视频一区二区三区| 久久久久久国产精品无码超碰动画| 99精品国产在热久久无码| 午夜福利电影| 亚洲国产精品久久久久婷蜜芽| 亚洲乱亚洲乱妇无码麻豆| 日本疯狂爆乳xxxx| 日本丰满熟妇videossex| 日韩精品一区二区三区免费视频| 久久久久亚洲av无码专区网站| 国产免费av片在线播放| _97夜夜澡人人爽人人喊_欧美| 色欲国产麻豆一精品一av一免费| 久久久久99精品成人片三人毛片| 色八a级在线观看| 神马影院午夜dy888| 特级西西人体444www高清大胆| 久久伊99综合婷婷久久伊| 国产9 9在线 | 欧洲| 欧美亚洲一区二区三区| 特黄特色大片免费播放器图片| 九九线精品视频在线观看|